Quais são as dicas importantes para tornar o PCR bem sucedido?
1. Use amostras de ácido nucleico de alta qualidade.
2. Primers de design cuidadosamente que são específicos para a sequência de destino.
3. otimizar a temperatura de recozimento e concentração de primer.
4. Certifique-se de que os componentes da reação de PCR estejam bem misturados.
5. Use uma DNA polimerase de alta fidelidade.
6. adicionar reagentes, tais como betaína ou DMSO, para melhorar a amplificação em amostras difíceis.
7. Incluir controles positivos e negativos para monitorar a contaminação e eficiência de PCR.
8. mantenha uma área de trabalho limpa e estéril para evitar a contaminação.
9. armazene e manuseie adequadamente reagentes para evitar degradação e contaminação.
10. Siga um protocolo padronizado e solucione possíveis problemas à medida que eles surgem.